Microscopio confocal
Ubicación y contacto
Actualmente se encuentra situado en la primera planta del edificio Cientificotècnic. Su responsable es Guillem Ramis (ext.2963).
Técnica
El microscopio confocal es un microscopio óptico que tiene 2 diafragmas:
Un diafragma de iluminación de medida invariable colocado detrás de la fuente de luz.
Un diafragma de medida variable situado delante del fotodetector, la utilidad del mismo es eliminar la luz emitida por la muestra localitada fuera del plano focal, permitiendo la obtención de secciones ópticas más o menos grandes, ésta es una propiedad única del microscopio confocal.
Estas "secciones ópticas" son combinación del diámetro del diafragma de detección, la abertura numérica del objectivo y la longitud de onda utilizada.
El haz del láser es dirigido a un punto concreto del plano focal. La luz reflejada por la muestra, o la fluorescencia emitida es dirigida y captada por un fotodetector, una vez atraviesa el diafragma. La imagen focal se obtiene después de rastrear la muestra (scanning) com el láser. Las imagenes obtenidas son siempre imagenes digitales: los fotodetectores (PMTs) transforman la señal luminosa en una señal eléctrica, que mediante el sistema informático acoplado, se traduce en un píxel. Cada píxel proporciona información referente a la localización tridimensional del punto excitado, así como de la intensitad lumínica de ese punto.
Equipamiento
El microscopio láser confocal de los SCT dispone de:
Microscopio óptico de fluorescéncia Leica microsystems DMRB.
Microscopio óptico de fluoresceéncia invertido Leica microsystems DMIRB, para análisis de microscopía de contrasti de fase, campo claro i fluorescéncia, equipado con pletina para la observación de placas de cultivo y análisis de celulas vivas.
Objectivos:
Leica N PLAN 5x/0.12 PH 0
Leica N PLAN 10x/0.25 PH 1
Leica N PLAN L 20x/0.40 PH 1
Leica N PLAN L 40x/0.55 PH 2
Leica N PLAN L 40x/0.65
Leica PL FLUOTAR L 63x/0.70 PH2
Leica N PLAN 100x/1.25 OIL
Cámara CCD ultra-rápida de alta sensibilidad pera la adquisición de imágenes , Leica microsystems DFC-360FX con software de análisis de imágenes LAS AF.
Microscopio Confocal Espectral de Barrido Láser (CLSM) de alta resolución Leica microsystems TCS SPE con lásers de estado sólido de 405, 488, 532 i 635 nm (dispositivos láser clase 3B/IIIb), con software LAS X.
Objectivos:
Leica ACS APO 10x/0.3 CS
Leica HC PL FLUOTAR 10x/0.30
Leica ACS APO 40x/1.15 OIL CS
Leica ACS APO 40x/1.25-0.75 OIL CS
Leica ACS APO 63x/1.30 OIL CS
Leica HCX PL APO 63x/1.40-0.60 OIL CS
Leica HCX PL APO 100x/1.40-0.70 OIL CS
Equipo para el análisis de células In Vivo equipado con cámara de incubación termostatizada y control de la saturación de CO2.
Aplicaciones
Son numerosas principalmente en el campo de la biología y con la particularidad de que permite hacer observaciones “in vivo”:
Identificar y localizar componentes moleculares específicos.
Estudios de disposición de proteínas y otros tipos de moléculas.
Transporte intracelular
Medida de concentraciones de ions intracelulars
Desarrollo y expressión genética
Hibridación in situ con sondas fluorescentes
Obtención de imágenes de fluorescéncia y luz transmitida, multicanal, multidimensional.
Microscopía de célula viva.
Análisis de proximidad y dinámica molecular. Co-localización
Mantenimiento de líneas celulares para experimentos de microscopía
Immunocitoquímica y Histocitoquímica: Marcages celulares y moleculares (transfecciones, tinciones), tanto en celulas animales com vegetals, así como en microorganismos.
Observación de muestras de materiales en campo claro y fluorescencia, en modo epifluorescencia y confocal.
Análisis de imágenes:
Procesado (filtrado, reconstrucciones 3D, montage vídeos) y análisis de imágenes (Co-localitzación, dinámica molecular, análisis de partículas y superficies).
Asessoramiento en el diseño, preparación, realitzación y análisis de experimentos de técnicas de microscopía óptica.
En el campo de ciéncia de materiales se aplica en la observación de la morfología de los defectos de sólidos como componentes microelectrónicos, polímeros, resinas, depósitos minerales, cerámicas metales, etc.